现已证实蚂蚁是一种广谱免疫增强剂〔1〕，对多种疾病治疗均有效。目前许多研究表明，虚证与机体免疫功能低下有关，我们参照文献复制了阳虚小鼠模型〔2〕，从免疫学角度探讨大黑蚂蚁水提液对阳虚小鼠的影响，旨在探索一有效的治疗方法。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 昆明种小白鼠、BALB/C小鼠，雄性，体重20～25g，长春生物制品所提供。
1.1.2 试剂 醋酸氢化泼尼松（AHP）湖北制药厂出品，含量125mg/5ml，批号890101，用前以生理盐水稀释成1mg/ml。刀豆蛋白A（ConA）与细菌脂多糖（LPS）为美国Sigma公司产品，3H-TdR，比放射性9.25×1011Bq为中国科学院原子能研究所产品。FJ2108型液体闪烁计数仪，西安262厂生产。
1.2 方法
1.2.1 实验步骤 将120只小鼠随机分为4批3组。第1批分组即阳虚组（10只）AHP100μg/20g．d-1，肌肉注射，实验第2天起灌服常水0.5ml/d；阳虚+蚂蚁液组（10只）AHP用量及方法同阳虚组，实验第2d起灌服蚂蚁煎剂0.5ml/d；对照组（10只）生理盐水0.1ml/d，肌肉注射，实验第2天起灌服常水0.5ml/d。第2、3、4批同上。连续用药6d后，第7天检查各项实验指标。
1.2.2 免疫器官重量测定 取第1批试验小鼠解剖，取出胸腺和脾脏，去除脏器周围结缔组织，用1/10000分析天平称量。脏器重量用mg/10g体重表示。
1.2.3 小鼠脾细胞的丝裂原的增殖反应 取第2批小鼠无菌制备脾细胞悬液，用RPMI1640完全营养液配成5×106/ml，取0.1ml加入96孔板中，再加入10μg/ml的ConA0.1ml，或20μg/ml的LPS0.1ml。37℃，5%CO2温箱中培养3d，收获前16h，每孔加入20μl3 H-TdR，用液闪仪测定cpm值〔3〕。
1.2.4 对小鼠脾细胞产生IL-2的影响 小鼠脾细胞诱导IL-2的方法，按文献〔4〕，IL-2测定用小鼠胸腺细胞测定方法〔5〕。
1.2.5 溶血空斑试验（PFC） 取第3批鼠经10%绵羊红细胞（SRBC）免疫4d后小鼠脾脏，以6mlHank''s液配成单脾细胞悬液。取脾细胞悬液20μl，10%绵羊红细胞50μl，1∶3豚鼠血清（补体）50μl，加Hank''s液180μl混匀。取180μl灌室，再用石蜡2份、凡士林1份封闭，置37℃2h，肉眼计数小室内溶血空斑数，计算全脾溶血空斑数。方法参照文献〔6〕。
1.2.6 腹腔巨噬细胞吞噬功能测定 第4批小鼠参照文献〔7〕方法测定。
1.3 统计学处理 各组数据以±s表示，组间均数比较采用t检验。
2 结 果
2.1 造型动物外观 肌注AHP后，小鼠均出现不同程度的体重减轻、拱背少动、腹泻、竖毛等症状，其中以阳虚组较重，阳虚+蚂蚁液组较轻。
2.2 对小鼠免疫器官重量的影响 各阳虚组在实验7d后剖检小鼠，其脾脏重量与对照组比较明显减少。阳虚+蚁液组的脾重明显高于阳虚组。对照组与阳虚+蚂蚁液组小鼠胸腺重量也明显高于阳虚组，组间经t检验差异非常显著，见表1。
表1 蚂蚁水煎剂对阳虚小鼠免疫器官重量的影响（±s）
组别n胸腺（mg/10g体重）脾脏（mg/10g体重）
阳虚组93.9±0.612.7±1.2
阳虚+蚂蚁
水煎剂组99.2±1.31）29.9±2.01）
正常对照组1026.6±2.01）42.6±2.81）
与阳虚组比较 1）P＜0.012.3 对小鼠脾细胞的丝裂原增殖反应影响 用致T细胞有丝分裂原ConA、致B细胞有丝分裂原LPS刺激后，观察3H-TdR掺入淋巴细胞转化试验（见表2）。不论是ConA或LPS刺激后，阳虚组小鼠淋巴细胞转化率较正常小鼠均明显降低，但阳虚动物同时给予蚂蚁水煎剂后淋巴细胞转化率有显著上升。表2 蚂蚁水煎剂对阳虚小鼠脾细胞增殖反应的影响（±s）组别n3 H-TdR掺入cpm值ConALPS阳虚组922346±547721163±7324阳虚+蚂蚁水煎剂组930517±32241）32638±68421）正常对照组1038568±84312）46041±85742）
与阳虚组比较，1）P＜0.05，2）P＜0.012.4 对ConA诱导小鼠脾细胞产生IL-2影响 蚂蚁水煎剂可增强ConA诱导的阳虚小鼠脾细胞产生IL-2水平，见表3。表3 蚂蚁水煎剂对阳虚小鼠脾细胞中产生IL-2影响（±s）组别n3 H-TdRcpm阳虚组92653±786阳虚+蚂蚁水煎剂组93927±15261）正常对照组104512±13411）
与阳虚组比较 1）P＜0.052.5 对特异性体液免疫功能影响 溶血空斑试验（PFC）阳虚组小鼠抗体形成细胞数较正常组小鼠明显减少，而同时给予蚁液的小鼠，其抗体形成细胞数显著增高，见表4。表4 蚂蚁水煎剂对阳虚小鼠PFC形成影响（±s）组别nPFC/脾阳虚组930881.1±5312.9阳虚+蚂蚁水煎剂组959568.8±5552.31）正常对照组10101587.5±17166.61）
与阳虚组比较1）P＜0.01表5 蚂蚁水煎对阳虚小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能影响（±s）组别n吞噬百分率（%）吞噬指数阳虚组932.6±6.31.08±0.17阳虚+蚂蚁水煎剂组946.2±6.91）1.33±0.241）正常对照组1055.5±5.62）1.37±0.331）
与阳虚组比较，1）P＜0.05，2）P＜0.012.6 对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 阳虚组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡RBC的百分率及吞噬指数明显低下，而蚁液可使其提高，见表5。3 讨 论 蚂蚁是一种温和的滋补良药，古代就有人将食用蚂蚁作为强身健体、延年益寿之法。蚂蚁蛋白质含量高，具有27种氨基酸，糖、脂肪和维生素也很丰富，曾有学者提出蚂蚁可作为―高效滋补剂而有益于人类。已有报道临床应用蚂蚁制剂治疗风湿性关节炎、慢性肝炎、失眠及阳萎等症。另有报道蚁醇提取物具有抗炎、平喘、镇静等功效。 阳虚小鼠模型其外观情况与文献报道一致〔2〕，其胸腺萎缩、重量减轻，与正常组相比较差异显著。蚂蚁煎剂可使其重量增加。蚂蚁煎剂还可提高阳虚小鼠脾脏T、B细胞的丝裂原增殖反应，促使阳虚小鼠脾脏抗体形成细胞数显著增加，表明此煎剂对阳虚小鼠的细胞免疫功能和体液免疫功能恢复具有增强作用。进一步研究发现蚂蚁水煎剂可促进阳虚小鼠体内IL-2的产生，IL-2是一种免疫增强因子，它的产生及活性关系到T、B细胞分化、增殖及免疫调节作用。提示蚂蚁水煎剂通过提高IL-2，可能是其对特异细胞免疫和体液免疫增强机制之一。蚂蚁水煎剂还可使阳虚小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的百分率和吞噬指数升高，表明该药对阳虚小鼠非特异性免疫功能也有增强作用。 已有报道临床有阳虚证候的患者免疫功能明显下降，用温阳药可以使患者的免疫功能得到改善〔8〕。本实验结果证实蚂蚁水煎剂对阳虚机体的免疫功能具有增强作用，为临床应用大黑蚂蚁治疗阳虚病人提供了依据，并提示此煎剂对免疫功能减退的老年病的防治将会起到有益的作用。蚂蚁的药理作用十分广泛，至于怎样影响阳虚实验动物模型的免疫功能，其机理还有待于进一步研究。作者简介 高 梅，女，36岁，讲师，主要从事中医中药免疫研究4 参考文献 1 王 忠，南景一，杨正娟etal.大黑蚂蚁不同提取物对免疫系统生物效应实验研究.老年学杂志，1987；7（4） 41 2 耿排力，杨贵贞.温阳药及其有效成分对阳虚动物模型某些免疫功能的影响.中医杂志，1983；24（3） 61 3 杨贵贞.免疫生物工程纲要与技术.第1版.长春 吉林科学技术出版社，1991 28-29 4 章灵华，王会贤，王立力etal.灵芝孢子粉提取物在体内外的免疫效应.中国免疫学杂志，1994；10（3） 170 5 张 蒲，张建中.IL-2产生的条件和不同测定方法的比较.中国免疫学杂志，1986；2（6） 367 6 谢蜀生，许士凯，张文仁etal.刺五加多糖免疫调节作用的实验研究.中华肿瘤杂志，19899；11（5） 337 7 徐叔云.小白鼠腹腔吞噬鸡红细胞实验.药理实验方法学.第1版，北京 人民卫生出版社，1982 9-36 8 邝安，丁 霆，陈家伦etal.阳虚病人内分泌、免疫和环核苷酸变化的初步观察.中华内科杂志，1979；18（2） 105
